· Guía de Micología · Carácter informativo y educativo
Conservación de Esporas
Biblioteca Genética a Largo Plazo
Ambiente ✗
→
4 °C · 1–3 años
→
−20 °C · 5–10+ años
→
−20 °C + glicerol · 10–20+ años
Sello · Sílica gel · Nevera · Congelador · Criopreservación
6 secciones · Etiquetado · Test de viabilidad · Organización
Secar 60–90 min
Sílica indicadora
Bolsa zip individual
Glicerol 10–15%
Test LC 7–14 días
I
Por qué Construir una Biblioteca Genética
Una espora viable es el punto de partida de todo el cultivo. Sin esporas no hay LC, sin LC no hay spawn, sin spawn no hay cosecha. Una biblioteca genética bien conservada es la diferencia entre depender de una fuente externa cada vez que se necesita material nuevo y tener acceso indefinido a las genéticas que has seleccionado, probado y conoces. Un sello correctamente conservado a −20 °C puede seguir viable después de 10 años.
Los tres enemigos de las esporas — La humedad activa el metabolismo y las enzimas de degradación. El calor acelera las reacciones de degradación química. La luz UV daña directamente el ADN esporal. Cada método de conservación es una estrategia para eliminar o reducir estos tres factores. El orden de eficacia es exactamente el orden de dificultad: sobre < nevera < congelador < criopreservación con glicerol.
El paso más omitido y más crítico — Secar completamente el sello antes de guardar — 30–60 minutos al aire limpio en zona sin corrientes. El sello recién hecho tiene humedad residual del sombrero. Solo cuando el sello está completamente seco al tacto, sin ninguna zona pegajosa, se dobla el aluminio y se guarda. Este paso es igual para todos los métodos.
II
Los Cinco Métodos
1
Sello en sobre o bolsa zip
1–6 meses · viabilidad 50–70%
Sello seco en papel de aluminio dentro de bolsa zip, a temperatura ambiente en lugar oscuro. Sin equipamiento adicional. Uso temporal — no es conservación a largo plazo.
2
Nevera con sílica gel
1–3 años · viabilidad >60%
El estándar doméstico. Bote hermético con sílica gel en el fondo a 4 °C. La combinación frío + baja humedad es exponencialmente mejor que cualquiera de los dos factores por separado.
3
Congelador con sílica gel
5–10+ años · viabilidad >50%
Mismo principio que el método 2 pero a −18/−20 °C. Las reacciones de degradación se ralentizan dramáticamente. Mayor riesgo: condensación al sacar el sello. Usar bolsas zip individuales obligatoriamente.
4
Jeringa en nevera o congelador
3–18 meses · más frágil que el sello
Las jeringas de esporas (esporas en agua destilada estéril) también se pueden conservar. Más cómodo para uso frecuente pero más frágil. Congelar jeringas SIN glicerol daña las esporas por cristales de hielo.
5
Criopreservación con glicerol
10–20+ años · máxima duración
El método de referencia en microbiología. El glicerol actúa como crioprotector: penetra las esporas y evita la formación de cristales de hielo que destruirían las membranas. Concentración óptima: 10–15%. Cada vial es de uso único.
| Método | Duración | Dificultad | Coste | Riesgo principal |
|---|---|---|---|---|
| Sello en sobre | 1–6 meses | Mínima | 0 EUR | Humedad, calor |
| Nevera + sílica | 1–3 años | Baja | 5–10 EUR | Variaciones de temperatura |
| Congelador + sílica | 5–10+ años | Baja-media | 5–10 EUR | Condensación al sacar |
| Jeringa congelador | 6–18 meses | Media | 5 EUR + glicerol | Cristales de hielo sin glicerol |
| Criopreservación | 10–20+ años | Media | 10–15 EUR total | Recongelación — uso único |
Método 2 · detalle
Nevera con Sílica — Paso a Paso
1
Preparar el contenedor
- Bote de cristal hermético con tapa de rosca.
- Capa de 1–2 cm de sílica gel en el fondo — preferentemente con indicador de color.
- Desinfectar el interior con IPA 70%. Dejar evaporar completamente antes de meter la sílica.
2
Preparar los sellos
- Cada sello: doblado en su papel de aluminio, completamente seco.
- Identificado con marcador: especie + cepa + fecha de depósito mínimo.
- Opcional: meter el sello dentro de una bolsa zip pequeña antes de poner en el bote.
3
Cerrar y neverar
- 4 °C — estante del medio, lejos de la puerta.
- NO en el cajón de verduras — la humedad es mayor.
- Revisar el color del indicador de sílica cada 2–3 meses.
Método 3 · detalle
Congelador — el Protocolo Anti-Condensación
El mayor riesgo del congelador no es el frío — es la condensación. Cada vez que se abre el bote se introduce humedad por condensación sobre las superficies frías. Solución: cada sello en su propia bolsa zip sellada. Al sacar un sello el resto no se expone al ciclo térmico.
1
Preparación específica para congelador
- Secar el sello más tiempo: 60–90 minutos al aire limpio antes de guardar.
- Empaquetar individualmente: sello en aluminio → bolsa zip pequeña sellada → etiquetar la bolsa.
- Nunca meter directamente en el bote sin bolsa zip individual.
2
Protocolo de extracción — crítico
- Al sacar un sello: NO abrir la bolsa zip inmediatamente.
- Dejar la bolsa zip CERRADA a temperatura ambiente durante 30–60 minutos.
- Solo cuando alcance la temperatura ambiente: abrir.
- La condensación sobre el sello frío destruye la viabilidad rápidamente.
3
Gestión del bote
- Decidir qué sello sacar ANTES de abrir el bote.
- Nunca dejar el bote abierto mientras se busca — el frío escapa y entra humedad.
- Revisar la sílica cada 6 meses. Regenerar si el indicador ha cambiado.
Método 5 · detalle
Criopreservación con Glicerol
El glicerol como crioprotector — Penetra la pared de la espora y desplaza el agua intracelular. Al congelar, se solidifica sin formar cristales — las membranas quedan intactas. Concentración óptima: 10–15%. A −20 °C doméstico: 10–20+ años de duración. La recongelación tras descongelado parcial destruye el efecto crioprotector. Cada vial es de uso único — no recongelar bajo ningún concepto.
1
Preparar la solución de glicerol estéril
- Glicerina farmacéutica pura 99% sin aditivos — cualquier farmacia, 3–5 EUR.
- Mezclar 1 parte de glicerina + 9 partes de agua destilada → solución al 10%.
- Esterilizar a 121 °C / 15 PSI / 20 minutos. Enfriar completamente antes de usar.
2
Preparar la suspensión esporas + glicerol
- Preparar jeringa de esporas normal en SAB.
- Mezclar 1 parte de jeringa de esporas + 1 parte de solución de glicerol fría.
- Resultado: esporas en glicerol al 5–7,5% — dentro del rango crioprotector.
- Agitar suavemente para homogeneizar.
3
Distribuir en viales pequeños
- Frasquitos de cristal 5–10 ml o viales con tapón de rosca.
- 2–3 ml por vial — cada vial es de uso único.
- Etiquetar: especie, cepa, fecha, método, número de vial.
- Sellar con parafilm alrededor de la tapa.
4
Congelación gradual
- Nevera 4 °C durante 30–60 minutos antes del congelador.
- La congelación gradual reduce el estrés térmico y mejora la viabilidad.
- Pasar al congelador −18/−20 °C.
- No descongelar y recongelar bajo ningún concepto.
5
Descongelación para usar
- Sacar el vial. Dejar descongelar a temperatura ambiente con el vial cerrado.
- Nunca acelerar con calor.
- Una vez a temperatura ambiente: usar inmediatamente para inocular LC.
- El material descongelado no se puede recongelar.
III
Regenerar la Sílica Gel
La sílica gel saturada no se tira — es regenerable indefinidamente. El indicador de color es la herramienta que avisa cuándo hacerlo.
Azul activo
→
Rosa saturado
Sílica con indicador azul. Regenerar cuando vira a rosa.
Naranja activo
→
Verde saturado
Sílica con indicador naranja. Regenerar cuando vira a verde.
Blanca sin indicador
→
Sin cambio visible
Sin indicador. Regenerar preventivamente cada 3–6 meses.
Proceso de regeneración — Extender la sílica en capa fina en bandeja de horno. Hornear a 120–150 °C durante 2–3 horas. Sacar los sellos antes — el calor destruye las esporas. Sacar y enfriar en recipiente hermético cerrado. Una sílica bien regenerada vuelve al color activo al enfriarse. Si no recupera el color tras regenerar: agotada, reemplazar. Coste de 500 g con indicador: 5–10 EUR. Dura años con regeneración.
IV
Organizar la Biblioteca Genética
Sistema de numeración sugerido — [Especie abreviada]-[Cepa]-[Año]-[Número secuencial]. Ejemplo: PC-GT-24-003 = Psilocybe cubensis, Golden Teacher, 2024, tercer sello. El número de flush importa: esporas del primer o segundo flush tienen mayor vigor genético que las de flushes tardíos.
| Campo del registro | Descripción | Ejemplo |
|---|---|---|
| ID | Código único del sello | PC-GT-24-003 |
| Especie | Nombre científico completo | Psilocybe cubensis |
| Cepa | Nombre de la variedad | Golden Teacher |
| Fecha depósito | Cuándo se guardó | 15/03/2024 |
| Flush origen | Número del flush del ejemplar donante | Flush 1 |
| Características donante | Lo que recuerdas del ejemplar | Colonización rápida, sombrero grande, azulado intenso |
| Método conservación | Cómo está guardado | Nevera + sílica gel |
| Última viabilidad | Fecha y resultado del test de germinación | Ago 2024 — LC con grumos en 8 días |
| Cantidad restante | Cuánto queda del sello sin raspar | ~70% |
V
Verificar la Viabilidad antes de Usar
No hay forma de saber si unas esporas conservadas siguen viables sin probarlas. El aspecto del sello no dice nada sobre la viabilidad — un sello perfectamente negro puede tener 5% de germinación si se conservó mal.
Test estándar — Preparar una jeringa con el sello e inocular un frasco pequeño de LC de DME al 1%. Incubar a 23–25 °C. Observar diariamente. Testear en LC de 250 ml, no directamente en grano — más sensible y menos costoso. Registrar siempre el resultado en el log de la biblioteca. Hacer test preventivo cada 12–18 meses con sellos de largo plazo aunque no se vayan a usar.
Grumos en 5–10 días
>50%
Viabilidad alta. Usar con confianza.
Registrar resultado. Sin cambios.
Grumos en 10–16 días
20–50%
Viabilidad media.
Usar el doble de cantidad de esporas al inocular.
Actividad en día 14–21
<20%
Viabilidad baja.
Usar solo para LC. Raspar más sello para la jeringa.
Sin actividad al día 21
~0%
Viabilidad muy baja o nula.
Último intento: máximas esporas en mínimo LC. Si falla: sello comprometido.
VI
Cuándo Reemplazar el Material
| Señal | Acción |
|---|---|
| Viabilidad <20% en test | Producir nuevo sello del mismo ejemplar si está disponible. Si no: buscar la misma cepa de otra fuente. |
| Sello más tiempo del estimado para el método | Test de viabilidad preventivo. Si pasa: registrar. Si no: renovar. |
| Sílica más de 6 meses sin revisar | Revisar color del indicador. Regenerar si ha cambiado. |
| Pérdida de etiqueta o duda sobre el contenido | Test de viabilidad + morfología en agar para confirmación. Sin seguridad: descartar. |
| Corte de luz prolongado en congelador | Test de viabilidad inmediato. La descongelación parcial puede haber comprometido el material. |
Resumen
Lo esencial en seis puntos
1
Secar completamente antes de guardar — 60–90 min al aire. El paso más omitido y más crítico.
2
Nevera + sílica = estándar. Congelador + sílica = largo plazo. Glicerol = máxima duración.
3
Sílica con indicador de color. Revisar cada 3–6 meses. Regenerar a 120–150 °C cuando cambia.
4
Al sacar del congelador: bolsa cerrada hasta temperatura ambiente. La condensación destruye las esporas.
5
Etiquetar todo: especie, cepa, fecha, flush del donante. Sin registro la biblioteca pierde valor en meses.
6
Test de viabilidad en LC antes de usar material >12 meses. Grumos en 7–14 días = viable.
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